現(xiàn)在許多科研單位和花木生產(chǎn)企業(yè)都已配置了組織培養(yǎng)室。組培技術(shù)已成為重要的生物技術(shù)之一。然而有的組培室組培苗的數(shù)量和質(zhì)量卻一直沒有質(zhì)的飛躍，究其原因，最主要的因素就是污染所造成的。被污染后首先是生產(chǎn)成本的提高;其二，對(duì)植株造成傷害;其三，增加接種源受污染的機(jī)率。

 組培室常見污染源

      組織培養(yǎng)過程中的污染源主要有以下幾種：

      (1)戶外風(fēng)大，菌類進(jìn)屋機(jī)會(huì)多。有風(fēng)就有沙，有沙就有塵，有塵就有菌，菌塵共存，這是菌類進(jìn)屋的主要原因之一。

      (2)屋內(nèi)太潮，菌類繁衍多。需保持室內(nèi)空氣干燥，如使用空調(diào)“除濕”功能，也可減少真菌生長(zhǎng)繁殖。

       (3)人員帶菌多。在整個(gè)操作室內(nèi)，人員可說是很大的帶菌者，不管在毛發(fā)或是衣服等地方，都隱藏著數(shù)不清的菌類。在進(jìn)入操作室前，能對(duì)作業(yè)人員進(jìn)行清潔處理，比如換上干凈的白大褂，換上實(shí)驗(yàn)室的鞋，衣服鞋每星期洗一次，上超凈臺(tái)前手要用肥皂清洗兩遍，接種前手再用酒精擦拭一遍。

       (4)屋內(nèi)不干凈。紫外線能殺滅或抑制真菌生長(zhǎng)，因此應(yīng)在每次接種前進(jìn)行20分鐘的紫外燈消毒。

       (5)清理屋內(nèi)帶菌組培苗。在植物病害中，真菌所引起的病害尤其嚴(yán)重，且因會(huì)產(chǎn)生孢子，隨著空氣飄散。一旦落入適當(dāng)?shù)沫h(huán)境下，一粒小小的孢子便會(huì)擴(kuò)大成一個(gè)菌落，污染整個(gè)組織培養(yǎng)瓶。因此一旦有真菌污染的組培苗，就要用高壓滅菌器完全消滅，以防擴(kuò)散。(6)接種不正確。不正確操作也會(huì)增加污染機(jī)率，如開蓋太快，滅菌不夠，操作過慢等。接種過程應(yīng)該輕開蓋，快操作。

組培室污染原因

       若污染菌類是零星分散在培養(yǎng)基中，則可確定是人為引起的污染，比如培養(yǎng)基滅菌不完全;超凈工作臺(tái)長(zhǎng)時(shí)間不換濾網(wǎng)，致使凈化能力降低;接種用具滅菌不完全;操作不正確，動(dòng)作生硬緩慢，開瓶時(shí)間太久，接種臺(tái)擺放物品雜亂，操作在人體范圍之內(nèi);接種室長(zhǎng)期不滅菌，菌類太多等。

       若污染菌類是從材料周圍長(zhǎng)起，則可證明是植物材料帶菌引起。可能是接種用具滅菌不完全，接種時(shí)材料被污染;或者是未及時(shí)發(fā)現(xiàn)污染苗，接種過程交叉感染等。

       若菌類從材料培養(yǎng)基以上部分長(zhǎng)起，而不是從培養(yǎng)基先長(zhǎng)起，且發(fā)生在5天以后，則說明是材料帶的內(nèi)生菌。若從培養(yǎng)基以下開始長(zhǎng)菌，發(fā)生時(shí)間較早，且有從里向外的趨勢(shì)，則說明是切口引起的污染，原因可能是滅完菌后，未剪去兩個(gè)切口或雖剪但器具帶菌。

組培室污染苗如何搶救?

真菌污染后，如果已形成孢子，則要經(jīng)高壓滅菌后扔掉，即使僅形成菌絲也應(yīng)處理后扔掉，因?yàn)榫z能夠達(dá)到材料內(nèi)部，因此，真菌污染是滅絕性的。

細(xì)菌污染后，由于細(xì)菌繁殖是靠芽孢，細(xì)菌不會(huì)彌散在整個(gè)空間，因此只要及時(shí)發(fā)現(xiàn)，可將材料上部未感菌的部分剪下轉(zhuǎn)接，材料仍可以用。